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产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞 | 11802ES80 | 10×100 μL | 166.00 |
DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞 | 11802ES92 | 100×100 μL | 1236.00 |
产品描述
本品是采用DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传,适用于蓝白斑筛选。DH5α细胞重组酶recA1和核酸内切酶endA1基因缺失突变使其能保证克隆DNA的稳定性。使用pUC18质粒检测,转化效率约达10 cfu/μg DNA。
DH5α细胞基因型:F φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 endA1 recA1 hsdR17 (r,m ) supE44 λ- thi-1 gyrA96 relA1
产品组分
编号 | 组分 | 11802ES80 | 11802ES92 |
11802-A | DH5α 感受态细胞 | 100 μL×10 | 100 μL×100 |
运输与保存方法
干冰运输;DH5α 感受态细胞-80℃保存,有效期6个月。请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
注意事项
1. 本产品应保存在-80℃,不可反复冻融,以免降低感受态细胞的转化效率。
2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长,感受态细胞刚化冻时转化效率最高。
3. 蓝白斑筛选时,需在平板上预先涂布 IPTG和X-gal。
使用方法
1. 取100 μL感受态细胞,冰浴、解冻。
注:感受态细胞的建议用量为50-100 μL,解冻后的感受态细胞不建议二次使用。
2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻弹匀,冰浴静置30 min。
注:所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
3. 42℃水浴中热激90 s,然后快速将EP管转移到冰上,静置2 min。
4. 向感受态细胞中加入900 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基,混匀。置于37℃摇床温育45 min。
5. 取不同体积的转化产物,涂布至培养板中,37℃培养12-16 h。